Uso de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) e inmunofluorescencia indirecta (IFA) como técnicas de diagnóstico para ehrlichia spp en donadores de Bancos de sangre /
El estudio de la erliquiosis en humanos de Costa Rica inició en el año 2005 cuando una niña de Santa Ana manifestó signos clínicos compatibles con la enfermedad, y de ahí surgió la necesidad de determinar la presencia de los agentes causales de esta patología en el país. En este proyecto de...
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| Format: | Thesis Book |
| Language: | Spanish |
| Published: |
[San José], Costa Rica,
2015.
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| Online Access: | Ver documento en repositorio |
| Summary: | El estudio de la erliquiosis en humanos de Costa Rica inició en el año 2005 cuando una niña de Santa Ana manifestó signos clínicos compatibles con la enfermedad, y de ahí surgió la necesidad de determinar la presencia de los agentes causales de esta patología en el país. En este proyecto de investigación se implementaron dos técnicas de diagnóstico: la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) del gen dsb y la secuenciación para determinar la presencia de ADN de Ehrfichia canis, Ehrfichia chaffeensis y Ehrlichia ewingii en sangre de humanos, y la inmunofluorescencia indirecta (IFA) para la detección de anticuerpos lgG contra E. canis en suero de humanos. Con la PCR del gen dsb y la secuenciación, se determinó la presencia de E. canis en diez (3,6%) de 280 muestras de sangre de donadores del Banco de Sangre del Hospital San Juan de Dios; no se detectó ni E. chaffeensis ni E. ewingii. Este hallazgo representa el primer reporte de la presencia de E. canis en humanos de Costa Rica y Centroamérica. La inmunofluorescencia indirecta logró detectar anticuerpos lgG contra E. canis en 35 (35,0%) de 100 sueros analizados de donadores del Banco de Sangre del Hospital San Juan de Dios: un 85,7% (30) con títulos bajos (1:64 a 1:256) y un 14,3% (5) con altos títulos (1:1024 a 1:8192); estas cinco muestras con títulos altos mostraron resultados PCR positivos a E. canis. Esto representa el primer reporte de detección de anticuerpos lgG contra E. canis y ADN de E. canis en humanos de Costa Rica. The study of human ehrlichiosis in Costa Rica began in 2005 when a girl of Santa Ana showed clinical signs consistent with the disease, hence the need arose to determine the presence of the causative agents of this disease in the country. In this research project two diagnostic techniques were used, the Polymerase Chain Reaction (PCR) of the dsb gen and sequencing to determine the presence of Ehrfichia canís, Ehrlíchia chaffeensis and Ehrlichia ewingii in human blood donors, and the indirect inmunofluoerescence assay (IFA) for detection of antibodies against E. canis in human serum. The presence of E. canis was determined in 10 (3,6%) out of 280 blood samples from donors of Blood Banks using dsb PCR and sequencing; neither E. chaffeensis or E ewingiíwas detected. This represents the first report of the presence of E. can is in human blood samples from Costa Rica and the Central American region. With indirect inmunofluorescence it was possible to detect antibodies lgG against E. canis in 35 (35,0%) out of 100 samples examined from Blood Bank donors, 85,7% (30) of the samples showed Jow titers (1:64 to 1:256) and 14,3% (5) high titers (1:1024 to 1:8192); these five sera with high titers reacted PCR positive to E. canis. This represents the first report of the detection of lgG antibodies against E. canis and DNA of E. canis in humans in Costa Rica and Central America. Statistical analysis found no significant association between gender of donors and PCR positivity; however, a higher probability of infection with increasing age was established. No association was found between the positivity of IFA and gender and age of the donor. Further research on the geographical distribution of antibodies and DNA of E. canis in humans of Costa Rica and isolation of the agent is recommended. |
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| Physical Description: | xii, 51 hojas. : ilustraciones en blanco y negro, 1 ilustración a color. |